流式細(xì)胞儀-CyFlow Space
德國(guó)Partec是全球三大流式細(xì)胞儀生產(chǎn)廠家之一,其產(chǎn)品遍布全球180多個(gè)國(guó)家和地區(qū),是卓越性能和優(yōu)良品質(zhì)的代名詞。公司成立于1967年,Partec公司早在1968年生產(chǎn)出第一臺(tái)商用流式細(xì)胞儀,是流式細(xì)胞儀的制造先驅(qū)。2013年Sysmex公司收購(gòu)Partec公司后,成立Sysmex-Partec公司。Sysmex-Partec公司研制了新一代智能CyFlow®系列流式細(xì)胞儀和CyFlow®分選系統(tǒng)。具備經(jīng)典、穩(wěn)定的光學(xué)、液流系統(tǒng),結(jié)合目前先進(jìn)的計(jì)算機(jī)和數(shù)字電子技術(shù),實(shí)現(xiàn)了流式細(xì)胞儀智能化、操作便捷化的革命。
一、靈活搭配激光,最高五激光十三色配置
CyFlow® Space設(shè)計(jì)緊湊,其所有的模塊和組件僅容納在長(zhǎng)560×寬650×高300mm的狹小空間內(nèi),相對(duì)于其他可用FCM系統(tǒng),CyFlow® Space不需要連接任何外部設(shè)備。組件模塊化設(shè)計(jì),可根據(jù)用戶需求進(jìn)行光路調(diào)整,包括激光器更換、熒光通道更換等,易于維護(hù)。可選配CyFlow® Robby自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng),兼容96孔板、384孔板,可在15min完成96孔板分析。CyFlow® Space最高配置5個(gè)光源,包括4個(gè)可選激光器和高能365nm紫外光光源,配置13個(gè)熒光通道,可檢測(cè)16個(gè)光學(xué)參數(shù)(13個(gè)熒光通道+2×FSC+SSC)。
CyFlow® Space——可選擇的激光光源
二、最低檢測(cè)50nm顆粒
大部分常規(guī)流式細(xì)胞儀的分辨率都在200-500nm之間,無(wú)法分析納米級(jí)生物顆粒,例如細(xì)菌、病毒、亞細(xì)胞器和細(xì)胞外囊泡(EV)等顆粒。在檢測(cè)小顆粒時(shí),側(cè)向角散射光分辨率優(yōu)于前向角散射光,首要原因在于大部分流式細(xì)胞儀的前向角檢測(cè)器使用低靈敏度的二極管,側(cè)向角檢測(cè)器和熒光信號(hào)檢測(cè)器都使用了高靈敏度的光電倍增管(PMT)或雪崩式光電二極管(APD),如果前向角也使用高靈敏度的PMT或APD呢?在檢測(cè)納米顆粒時(shí),SSC的效果還是要比FSC好,原因在于如果檢測(cè)顆粒直徑遠(yuǎn)大于入射光波長(zhǎng),即常規(guī)檢測(cè)細(xì)胞的情形,散射光符合米氏散射規(guī)律(Mie scattering theory),散射光的信號(hào)強(qiáng)度和測(cè)量角度密切相關(guān),前向角的檢測(cè)效率優(yōu)于側(cè)向角,但如果在檢測(cè)納米顆粒時(shí),直徑遠(yuǎn)小于入射光波長(zhǎng),符合瑞利散射規(guī)律,檢測(cè)角度并不是影響散射光效率的因素,側(cè)向角的背景信號(hào)會(huì)遠(yuǎn)低于前向角,所以SSC在檢測(cè)納米顆粒時(shí)分辨率會(huì)比FSC更有優(yōu)勢(shì)。
CyFlow® Space采用經(jīng)典穩(wěn)定的PMT光電倍增管檢測(cè)器,前向角FSC也采用PMT而非低靈敏度的二極管,保證了前向角的分辨率,可以最低檢測(cè)50nm顆粒,CyFlow® Space在納米級(jí)顆粒分析提供足夠的優(yōu)勢(shì)。
使用CyFlow® Cube8可檢測(cè)100nm顆粒
使用CyFlow® Space可檢測(cè)45nm顆粒
三、TVAC定體積絕對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)功能
CyFlow® Space采用定體積細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)方法(TVAC)對(duì)所有顆?;蚣?xì)胞的濃度進(jìn)行測(cè)定。這種先進(jìn)的專(zhuān)利技術(shù)完全基于絕對(duì)計(jì)數(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn),即:顆粒濃度(C)是給定體積(V)內(nèi)的細(xì)胞數(shù)量(N),C= N/V。給定體積(V)是在已知直徑的的樣品管內(nèi)兩個(gè)電極之間的距離或者控制樣品速度的體積進(jìn)行測(cè)量。
TVAC的特點(diǎn):
1、絕對(duì)計(jì)數(shù)變異系數(shù)CV≤2%;
2、無(wú)需校正微球,節(jié)約成本;
3、無(wú)校正微球所引起的誤差,提高精度;
4、節(jié)約成本,簡(jiǎn)化準(zhǔn)備步驟。
四、高精度石英流動(dòng)室
Partec擁有超過(guò)40年的流動(dòng)室設(shè)計(jì)經(jīng)驗(yàn)與技術(shù),其生產(chǎn)的高機(jī)械精密度石英流動(dòng)室尺寸為250um×350um,孔徑大不易堵塞,散射粒度范圍跨度涵蓋50nm至200μm。其核心技術(shù)是顆粒在高速流經(jīng)流動(dòng)室時(shí),通過(guò)高壓鞘液的包裹,準(zhǔn)確、穩(wěn)定、連續(xù)地通過(guò)各個(gè)激光的光斑中心,被激發(fā)的熒光信號(hào)通過(guò)光膠耦合下的大孔徑物鏡被最大程度地接收。高精度石英流動(dòng)室的專(zhuān)利技術(shù)可保證所有參數(shù)的精確度達(dá)到很高,即變異系數(shù)CV≤2%,樣本采用計(jì)算機(jī)控制推進(jìn)器技術(shù),其單一方向通過(guò)流動(dòng)室,有效避免了交叉污染。
五、注射泵驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)
CyFlow® Space采用注射泵驅(qū)動(dòng)進(jìn)樣,不存在擠壓管路造成管路變形的情況,耗材不易損壞,壽命長(zhǎng)達(dá)十年左右。所以由注射泵系統(tǒng)控制的絕對(duì)計(jì)數(shù)方式精確度很高,可長(zhǎng)期保持液路穩(wěn)定。進(jìn)樣速度0-1200ul/min連續(xù)精確可調(diào),調(diào)節(jié)精度0.1μL/s。液路簡(jiǎn)單,部分可兼容不同上樣管。
六、細(xì)胞分選系統(tǒng)
CyFlow®分選系統(tǒng)是Sysmex-Partec在流式細(xì)胞儀方面近50年的研究結(jié)晶。為了克服在常見(jiàn)分選過(guò)程中遇到的問(wèn)題,諸如:分選成本過(guò)高、操作復(fù)雜、樣品液滴容易暴露于生物危害較高的氣溶膠中、分選樣本易受污染、機(jī)械壓力等,Sysmex-Partec公司研發(fā)出了無(wú)菌封閉式的CyFlow®分選系統(tǒng)。CyFlow®分選機(jī)的模塊組成包括一個(gè)用于壓電激活的金剛石壓電元件和電子裝置。壓晶體管可以迅速準(zhǔn)確地使分選好的細(xì)胞偏轉(zhuǎn)到流動(dòng)單元的第二通道。CyFlow®分選機(jī)是Sysmex-Partec CyFlow® Space的可選設(shè)備,并作為一個(gè)優(yōu)化模塊用于簡(jiǎn)化和精確的細(xì)胞和顆粒分選操作。
在壓電激活過(guò)程中(圖1和2所示),將產(chǎn)生一個(gè)輕微的壓力波(圖3所示),因此,一小部分鞘液攜帶目的細(xì)胞或顆粒發(fā)生偏轉(zhuǎn)(圖4所示)。只要有細(xì)胞需要進(jìn)行分選,分選過(guò)程中的壓電激活將會(huì)不斷地重復(fù)。整個(gè)分選過(guò)程非常平穩(wěn),而且不存在傳統(tǒng)滴液分選的機(jī)械壓力等問(wèn)題。因此,即使是易碎的細(xì)胞或大顆粒,在被CyFlow®分選機(jī)分選時(shí)不會(huì)在偏轉(zhuǎn)過(guò)程中產(chǎn)生變形和其它外力作用。另外,CyFlow®分選機(jī)的一個(gè)特殊功能是可以在同個(gè)區(qū)域內(nèi)對(duì)所有細(xì)胞進(jìn)行正確分選。此高效率得益于數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)幾乎無(wú)空載時(shí)間。整個(gè)儀器硬件和軟件都是實(shí)時(shí)運(yùn)行不被打斷的,所以不會(huì)丟失任何數(shù)據(jù),而這種情況則經(jīng)常發(fā)生在其他現(xiàn)有的分選儀器上。因此 CyFlow®分選機(jī)不會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞分選的錯(cuò)誤,保證分選達(dá)到最高純度。
Sysmex-Partec CyFlow®分選系統(tǒng)極其穩(wěn)定,又因?yàn)檎麄€(gè)系統(tǒng)是封閉的,非彈性的,并且沒(méi)有空氣,因此不會(huì)產(chǎn)生任何干擾顆粒分析的振動(dòng),而在滴液分選儀器上則會(huì)經(jīng)常發(fā)生這種問(wèn)題。另外,基于CCD攝像機(jī)可以很容易地對(duì)分選延遲時(shí)間進(jìn)行調(diào)節(jié),所以微觀檢查是沒(méi)有必要的。同時(shí),Sysmex-Partec分選機(jī)在低壓力的毛細(xì)管系統(tǒng)中運(yùn)作,保證細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞活力(如像植物原生質(zhì)體一樣易碎的顆粒)將不會(huì)在分選過(guò)程中遭到損壞,從而實(shí)現(xiàn)了長(zhǎng)時(shí)間的分選運(yùn)行(可達(dá)上百毫升的樣本體積)。這款分選裝置可以安全的避免在常規(guī)操作條件下可以避免任何的環(huán)境污染。
在對(duì)測(cè)量和壓電激活之間的延遲時(shí)間控制方面,CyFlow®分選機(jī)可以對(duì)其進(jìn)行極為精確和穩(wěn)定的系統(tǒng)控制。CyFlow® Space的另一個(gè)特點(diǎn)是其內(nèi)置了CCD攝像機(jī)裝置,它允許實(shí)驗(yàn)者直接在儀器的屏幕上對(duì)整個(gè)分析過(guò)程進(jìn)行檢查,即使在分選過(guò)程中也可以進(jìn)行這樣的操作。
CyFlow®分選系統(tǒng)的特點(diǎn):
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操作簡(jiǎn)便,兩步操作,就像按快門(mén)一樣輕松;
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高生物安全性,無(wú)菌、全封閉設(shè)計(jì);
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采用不加電、不加壓的專(zhuān)利鉆石壓電晶體分選技術(shù),保證分選細(xì)胞活力;
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低成本,無(wú)需等待液流穩(wěn)定,無(wú)需計(jì)算液滴延遲。
七、FLOMAX®軟件功能強(qiáng)大且直觀
Windows? FloMax?軟件可以完成儀器控制、數(shù)據(jù)分析的各種功能,這些功能包括數(shù)據(jù)的實(shí)時(shí)采集、實(shí)時(shí)或離線數(shù)據(jù)分析、實(shí)時(shí)或離線的熒光補(bǔ)償?shù)裙δ?。該軟件可自由選擇、組合不同的參數(shù)設(shè)置界面和數(shù)據(jù)處理界面,便于不同應(yīng)用程序之間完成切換。FloMax?被用于免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞周期分析、DNA 定量、倍性分析等所有應(yīng)用領(lǐng)域。數(shù)據(jù)以流式細(xì)胞儀標(biāo)準(zhǔn)文件格式存儲(chǔ),方便與其他分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。FloMax?一個(gè)獨(dú)特的功能是,在進(jìn)行分析的同時(shí),對(duì)熒光的光譜重疊進(jìn)行數(shù)字形式的在線/離線顏色串?dāng)_補(bǔ)償。N色軟件補(bǔ)償算法允許在任何參數(shù)之間進(jìn)行串?dāng)_校正,而不需要重新跑樣。
FloMax®軟件系統(tǒng)完全支持CyFlow® Space的定體積絕對(duì)計(jì)數(shù)功能,即使在數(shù)據(jù)獲取之后,也能顯示任何細(xì)胞亞群的顆粒濃度。
FloMax?軟件規(guī)格
_ 基于 WindowsTM 的 FloMax®軟件,適用于常規(guī)工作和研究應(yīng)用
_ 可編輯 FloMax®用戶環(huán)境
_ 原始數(shù)據(jù)的存儲(chǔ)和評(píng)估采用流式細(xì)胞儀標(biāo)準(zhǔn)文件格式(FCS 2.0, 3.0)
_ 8-16 個(gè)光學(xué)參數(shù),可進(jìn)行實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)采集、分析和顯示
_ 64 個(gè)計(jì)算參數(shù)和時(shí)間參數(shù)
_ 一個(gè)參數(shù)的柱狀圖和二個(gè)參數(shù)的散點(diǎn)圖
_ 64-4096 的通道分辨率用于 1P 柱狀圖
_ 64/64-4096/4096 通道用于 2P 點(diǎn)圖
_ 線性 | 三個(gè) log | 四個(gè) log(可選)
_ 任意參數(shù)的單觸發(fā)或觸發(fā)所有
八、FCS Express數(shù)據(jù)分析軟件
FCS Express軟件專(zhuān)注于將流式細(xì)胞儀數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為結(jié)果。FCS Express可為您提供快速數(shù)據(jù)分析,創(chuàng)建可發(fā)布出版物的圖表,提供高級(jí)篩選工具等功能。通過(guò)將數(shù)據(jù)直接導(dǎo)出為PowerPoint,PDF,Excel,Word和高分辨率圖像格式,可以更快地獲得結(jié)果。
FCS Express軟件特點(diǎn):
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集成電子表格;
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出版期刊專(zhuān)用圖形;
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FDA列出的第一個(gè)第三方流式細(xì)胞術(shù)數(shù)據(jù)分析軟件;
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光譜分析;
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數(shù)據(jù)分析符合FDA的《電子記錄和電子簽名規(guī)則》(CFR Part 11 Compliance);
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tSNE / SPADE / k-means等數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)移;
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輕松創(chuàng)建和應(yīng)用補(bǔ)償;
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批量處理數(shù)據(jù);
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門(mén)移動(dòng)或數(shù)據(jù)更改時(shí),統(tǒng)計(jì)值將實(shí)時(shí)更新;
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熱圖顯示流式細(xì)胞圖像統(tǒng)計(jì)。
特點(diǎn)
概述:
●選用國(guó)際大廠的激光器和濾光鏡,高質(zhì)量的組件是性能穩(wěn)定的保障;
●組件模塊化,可根據(jù)用戶需求進(jìn)行光路調(diào)整,包括激光器更換、熒光通道更換,方便維護(hù)和升級(jí);
●靈活的模塊化設(shè)計(jì),可定制各種不同研究、應(yīng)用用途儀器可面向不同應(yīng)用定制不同配置;
●德國(guó)制造工藝,性能一流,保證數(shù)據(jù)的精確性;
●超過(guò)40年的流動(dòng)室研發(fā)經(jīng)驗(yàn),經(jīng)典和創(chuàng)新的完美結(jié)合;
●激光搭配靈活,最高五激光十三色,高性能、一體化設(shè)計(jì)為您的細(xì)胞分析提供解決方案;
●可放入生物安全柜中;
●出色的流體動(dòng)力聚焦,使所有通道熒光變異系數(shù)CV≤2 %;
●熒光靈敏度:≤100 MESF(FITC) ;≤50 MESF(PE);
●閾值可多通道調(diào)節(jié);
●顆粒檢測(cè)范圍:50nm - 100μm;
●內(nèi)置CCD攝像機(jī)裝置,用于流動(dòng)室檢測(cè)區(qū)液流監(jiān)控。
光路系統(tǒng)
●最高配備5個(gè)光源:可配備用于DNA高精度檢測(cè)的高能365nm紫外光光源;
●無(wú)光纖引導(dǎo),激光空氣傳輸,避免光纖帶來(lái)的功率降低和使用成本增加;
●激光器可單獨(dú)開(kāi)關(guān),延長(zhǎng)激光器壽命;
●采用光電倍增管(PMT)檢測(cè)器,極低的信號(hào)丟失率,可檢測(cè)低至50nm的顆粒;
●真正的插拔式模塊化光路設(shè)計(jì),便于維護(hù)、保養(yǎng)和升級(jí);
●16個(gè)光學(xué)參數(shù),13個(gè)熒光通道+2×FSC+SSC,(均采用光電倍增管技術(shù),目前主流儀器都采用此類(lèi)型檢測(cè)器,確保數(shù)據(jù)完整記錄);
●標(biāo)準(zhǔn)濾光片組;
●光膠耦合成像系統(tǒng),用于檢測(cè)微量的細(xì)胞因子(選配)。
液路系統(tǒng)
●TVAC細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù),節(jié)約成本和時(shí)間;
●250um×350um專(zhuān)利流動(dòng)室,孔徑大不易堵塞,變異系數(shù)CV≤2%;DNA檢測(cè)CV≤1%;
●進(jìn)樣速度:0.1-20ul/s可調(diào);
●真空泵動(dòng)力設(shè)計(jì),800mbar防止管路堵塞;
●檢測(cè)速度:25,000 cells/s;
●可選配自動(dòng)上樣器,兼容96孔板,384孔板,可在15min完成96孔板分析。
分選系統(tǒng)
●操作簡(jiǎn)便,兩步操作,選擇待分選細(xì)胞群,點(diǎn)擊分選按鈕;
●高生物安全性,無(wú)菌、全封閉設(shè)計(jì);
●采用專(zhuān)利鉆石壓電晶體分選技術(shù),保證分選細(xì)胞活力;
●低成本,無(wú)需等待液流穩(wěn)定,無(wú)需計(jì)算液滴延遲。
應(yīng)用
細(xì)胞凋亡的檢測(cè)與分析
DNA含量檢測(cè)和細(xì)胞周期檢測(cè)
倍性和基因組大小檢測(cè)
細(xì)胞的增殖檢測(cè)
細(xì)胞毒性的檢測(cè)
可溶性蛋白質(zhì)分子的檢測(cè)
報(bào)告基因的檢測(cè)
細(xì)胞因子檢測(cè)
免疫分型檢測(cè)
細(xì)胞內(nèi)活性氧水平的檢測(cè)
細(xì)胞膜電位檢測(cè)
細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度檢測(cè)
微生物檢測(cè)
CyFlow Space
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