流式細(xì)胞儀-CyFlow Cube8
德國(guó)Partec是全球三大流式細(xì)胞儀生產(chǎn)廠家之一，其產(chǎn)品遍布全球180多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，是卓越性能和優(yōu)良品質(zhì)的代名詞。公司成立于1967年，Partec公司早在1968年生產(chǎn)出第一臺(tái)商用流式細(xì)胞儀，是流式細(xì)胞儀的制造先驅(qū)。2013年Sysmex公司收購(gòu)Partec公司后，成立Sysmex-Partec公司。Sysmex-Partec公司研制了新一代智能CyFlow®系列流式細(xì)胞儀。具備穩(wěn)定的光學(xué)、液流系統(tǒng)，結(jié)合目前計(jì)算機(jī)和數(shù)字電子技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了流式細(xì)胞儀的智能化、操作便捷化。
一、高性能、一體化設(shè)計(jì)、低成本
CyFlow® Cube 8采用內(nèi)置電腦設(shè)計(jì)，外形小巧精致，長(zhǎng)500×寬470×高355mm，十分方便進(jìn)行戶外檢測(cè)。在功能配置方面，其內(nèi)置Windows? PC、15" 液晶顯示屏，配備了USB、LAN、視頻輸出等標(biāo)準(zhǔn)接口，支持第二塊拓展顯示器。組件模塊化設(shè)計(jì)，可根據(jù)用戶需求進(jìn)行光路調(diào)整，包括激光器更換、熒光通道更換等，易于維護(hù)?？蛇x配CyFlow® Robby 8自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)，兼容48孔板、96孔板和2mL流式管。CyFlow® Cube 8配備3種激光模塊，可選高能365nm紫外光光源，配置6個(gè)熒光通道（FL1、FL2、FL3、FL4、FL5、FL6），可檢測(cè)8個(gè)光學(xué)參數(shù)（6熒光通道+FSC+SSC）。
CyFlow® Cube 8——可選擇的激光光源
二、TVAC定體積絕對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)功能
CyFlow® Cube 8采用定體積細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)方法（TVAC）對(duì)所有顆?；蚣?xì)胞的濃度進(jìn)行測(cè)定。這種技術(shù)基于絕對(duì)計(jì)數(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)，即：顆粒濃度（C）是給定體積（V）內(nèi)的細(xì)胞數(shù)量（N），C= N/V。給定體積（V）是在已知直徑的的樣品管內(nèi)兩個(gè)電極之間的距離或者控制樣品速度的體積進(jìn)行測(cè)量。
TVAC的特點(diǎn)：
1、絕對(duì)計(jì)數(shù)變異系數(shù)CV≤2%；
2、無(wú)需校正微球，節(jié)約成本；
3、無(wú)校正微球所引起的誤差，提高精度；
4、節(jié)約成本，簡(jiǎn)化準(zhǔn)備步驟。
三、高精度石英流動(dòng)室
Partec擁有超過(guò)40年的流動(dòng)室設(shè)計(jì)經(jīng)驗(yàn)與技術(shù)，其生產(chǎn)的高機(jī)械精密度石英流動(dòng)室直徑250um，不易堵塞，散射粒度范圍跨度涵蓋100nm至100μm。其核心技術(shù)是顆粒在高速流經(jīng)流動(dòng)室時(shí)，通過(guò)高壓鞘液的包裹，準(zhǔn)確、穩(wěn)定、連續(xù)地通過(guò)各個(gè)激光的光斑中心，被激發(fā)的熒光信號(hào)通過(guò)光膠耦合下的大孔徑物鏡被最大程度地接收。高精度石英流動(dòng)室的技術(shù)可保證所有參數(shù)的精確度達(dá)到很高，即變異系數(shù)CV≤2%，樣本采用計(jì)算機(jī)控制推進(jìn)器技術(shù)，其單一方向通過(guò)流動(dòng)室，有效避免了交叉污染。
四、注射泵驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)
CyFlow® Cube 8采用注射泵驅(qū)動(dòng)進(jìn)樣，不存在擠壓管路造成管路變形的情況，耗材不易損壞，壽命長(zhǎng)達(dá)十年左右。所以由注射泵系統(tǒng)控制的絕對(duì)計(jì)數(shù)方式精確度很高，可長(zhǎng)期保持液路穩(wěn)定。進(jìn)樣速度0-1200ul/min連續(xù)精確可調(diào)，液路簡(jiǎn)單，部分可兼容不同上樣管。
五、CyView?軟件系統(tǒng)功能強(qiáng)大、操作簡(jiǎn)單
Windows? CyView?軟件可以完成儀器控制、數(shù)據(jù)分析的各種功能，這些功能包括數(shù)據(jù)的實(shí)時(shí)采集、實(shí)時(shí)或離線數(shù)據(jù)分析、實(shí)時(shí)或離線的熒光補(bǔ)償?shù)裙δ堋Ｔ撥浖勺杂山M合不同的參數(shù)設(shè)置界面和數(shù)據(jù)處理界面，便于不同應(yīng)用程序之間完成切換。該軟件可自由組合不同的參數(shù)設(shè)置界面和數(shù)據(jù)處理界面，便于不同應(yīng)用程序之間完成切換。CyView?被用于免疫學(xué)、病理學(xué)、細(xì)胞計(jì)數(shù)、微生物學(xué)、細(xì)胞周期分析、DNA定量、倍性分析、植物基因組大小等應(yīng)用領(lǐng)域。檢測(cè)數(shù)據(jù)可以流式細(xì)胞儀標(biāo)準(zhǔn)文件FCS格式存儲(chǔ)，以方便其他第三方分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。CyView?一個(gè)獨(dú)特的功能是，在進(jìn)行分析染料的同時(shí)，對(duì)熒光的光譜重疊進(jìn)行數(shù)字形式的在線/離線顏色串?dāng)_補(bǔ)償。N色軟件補(bǔ)償算法允許在任何參數(shù)之間進(jìn)行串?dāng)_校正，而不需要重新跑樣。
CyView?軟件系統(tǒng)完全支持 CyFlow® Cube 8的TVAC絕對(duì)計(jì)數(shù)功能，直接顯示任何細(xì)胞亞群的細(xì)胞濃度。
六、FCS Express數(shù)據(jù)分析軟件
FCS Express軟件專注于將流式細(xì)胞儀數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為結(jié)果。FCS Express可為您提供快速數(shù)據(jù)分析，創(chuàng)建可發(fā)布出版物的圖表，提供高級(jí)篩選工具等功能。通過(guò)將數(shù)據(jù)直接導(dǎo)出為PowerPoint，PDF，Excel，Word和高分辨率圖像格式，可以更快地獲得結(jié)果。
FCS Express軟件特點(diǎn)：
（1）集成電子表格；
（2）出版期刊專用圖形；
（3）FDA列出的第一個(gè)第三方流式細(xì)胞術(shù)數(shù)據(jù)分析軟件；
（4）光譜分析；
（5）數(shù)據(jù)分析符合FDA的《電子記錄和電子簽名規(guī)則》（CFR Part 11 Compliance）；
（6）tSNE / SPADE / k-means等數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)移；
（7）輕松創(chuàng)建和應(yīng)用補(bǔ)償；
（8）批量處理數(shù)據(jù)；
（9）門移動(dòng)或數(shù)據(jù)更改時(shí)，統(tǒng)計(jì)值將實(shí)時(shí)更新；
（10）熱圖顯示流式細(xì)胞圖像統(tǒng)計(jì)。
特點(diǎn)
概述：
●選用的激光器和濾光鏡，高質(zhì)量的組件是性能穩(wěn)定的保障；
●組件模塊化，可根據(jù)用戶需求進(jìn)行光路調(diào)整，包括激光器更換、熒光通道更換，方便維護(hù)和升級(jí)；
●靈活的模塊化設(shè)計(jì)，可定制各種不同研究、應(yīng)用用途儀器可面向不同應(yīng)用定制不同配置；
●德國(guó)制造工藝，性能好，保證數(shù)據(jù)的精確性；
●超過(guò)40年的流動(dòng)室研發(fā)經(jīng)驗(yàn)，經(jīng)典和創(chuàng)新的完美結(jié)合；
●三激光六色、高性能、一體化設(shè)計(jì)為您的細(xì)胞分析提供解決方案；
●可放入生物安全柜中；
●出色的流體動(dòng)力聚焦，使所有通道熒光變異系數(shù)CV≤2 %；
●熒光靈敏度：≤100 MESF(FITC) ；≤50 MESF(PE)；
●閾值可多通道調(diào)節(jié)；
●顆粒檢測(cè)范圍：100nm - 100μm。
光路系統(tǒng)
●配備3個(gè)光源：可配備用于DNA高精度檢測(cè)的高能365nm紫外光光源；
●無(wú)光纖引導(dǎo)，激光空氣傳輸，避免光纖帶來(lái)的功率降低和使用成本增加；
●激光器可單獨(dú)開(kāi)關(guān)，延長(zhǎng)激光器壽命；
●采用光電倍增管（PMT)檢測(cè)器，極低的信號(hào)丟失率，可檢測(cè)低至100nm的顆粒；
●真正的插拔式模塊化光路設(shè)計(jì)，便于維護(hù)、保養(yǎng)和升級(jí)；
●8個(gè)光學(xué)參數(shù)，F(xiàn)SC，SSC，F(xiàn)L1-FL6（均采用光電倍增管技術(shù)，目前主流儀器都采用此類型檢測(cè)器，確保數(shù)據(jù)完整記錄）；
●標(biāo)準(zhǔn)濾光片組；
●光膠耦合成像系統(tǒng)，用于檢測(cè)微量的細(xì)胞因子（選配）。
液路系統(tǒng)
●TVAC細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)，節(jié)約成本和時(shí)間；
●250um×350um專利流動(dòng)室，變異系數(shù)CV≤2%；DNA檢測(cè)CV≤1％；
●進(jìn)樣速度：0.1-20ul/s可調(diào)；
●真空泵動(dòng)力設(shè)計(jì)，800mbar防止管路堵塞；
●檢測(cè)速度：15,000 cells/s。
軟件其他
●Windows? CyView?軟件可以完成儀器控制、數(shù)據(jù)分析的各種功能；
●可選配CyFlow® Robby 6自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)，兼容48孔板、96孔板和流式管，現(xiàn)無(wú)人值守的高通量上樣。
應(yīng)用
細(xì)胞凋亡的檢測(cè)與分析
DNA含量檢測(cè)和細(xì)胞周期檢測(cè)
倍性和基因組大小檢測(cè)
細(xì)胞的增殖檢測(cè)
細(xì)胞毒性的檢測(cè)
可溶性蛋白質(zhì)分子的檢測(cè)
報(bào)告基因的檢測(cè)
表面抗原檢測(cè)
細(xì)胞內(nèi)活性氧水平的檢測(cè)
細(xì)胞膜電位檢測(cè)
細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度檢測(cè)
微生物檢測(cè)
參考文獻(xiàn)
【1】Yong‐Seok Han, Sang Min Kim, Jun Hee Lee, Seo Kyung Jung, Hyunjin Noh, Sang Hun Lee.Melatonin protects chronic kidney disease mesenchymal stem cells against senescence via PrPC‐dependent enhancement of the mitochondrial function.Int. J. Mol. Sci.20(9),1-18(2019).
【2】Manoj Kumar Mishra, Shatrujeet Pandey, Pratibha Misra, Abhishek Niranjan, Alka Srivastava.An effiffifficient protocol for clonal regeneration and excised root culture with enhanced alkaloid content in Thalictrum foliolosum DC.— an endemic and important medicinal plant of temperate Himalayan region. Industrial Crops & Products.152,112504 (2020) .
【3】Diana Spiegelberg,Adrian Dascalu,Anja C Mortensen，Andris Abramenkovs，Gamze Kuku, Marika Nestor,Bo Stenerl?w.The novel HSP90 inhibitor AT13387 potentiates radiation effects in squamous cell carcinoma and adenocarcinoma cells.Oncotarget, Vol. 6, No. 34.35653-35666(2015).
【4】Styliana Philippou,Nikolaos P. Mastroyiannopoulos,Neoklis Makrides,Carsten W. Lederer,Marina Kleanthous,LeonidasA.Phylactou.Selection and Identifification of Skeletal-Muscle-Targeted RNA Aptamers.Molecular Therapy: Nucleic Acids Vol. 10，199-214（2018）.
